SunRed 醋酸 細(xì)胞活性檢測(cè)是用于細(xì)胞活性檢測(cè)的試劑盒。酯酶可催化水解SunRed 乙酸鹽(SRA)產(chǎn)生Sun Red熒光基團(tuán),該熒光基團(tuán)在633nm處可以被激發(fā),發(fā)射光波長(zhǎng)在~660nm處。Sun Red熒光基團(tuán)可以用Cy5濾光片檢測(cè),大多數(shù)商業(yè)熒光儀器中都裝有Cy5濾光片。盡管Sun Red在633nm處被激發(fā),~660nm發(fā)出紅光;但是SRA在633nm處的光吸收很小,在沒(méi)有紅光發(fā)射的條件下,這使SRA成為最靈敏的NIR(近紅外)酯酶底物之一。在流行的熒光色彩應(yīng)用于其它細(xì)胞功能分析時(shí),SRA提供另一種顏色用于可行性細(xì)胞的分析。SRA是一個(gè)非熒光性的疏水性化合物,它可以通過(guò)細(xì)胞膜,在細(xì)胞內(nèi)酯酶水解乙酸鹽基團(tuán)作用下,產(chǎn)生高強(qiáng)度熒光的產(chǎn)物Sun Red。Sun Red分子在完整細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞內(nèi)積累至產(chǎn)生足夠深的紅色熒光,因此可以用作細(xì)胞的標(biāo)簽。細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)不完整或者代謝活性弱的細(xì)胞,不能夠積累熒光產(chǎn)物,因此不顯現(xiàn)深色的紅色熒光。SRA可以與綠色熒光染料試劑(例如FITC或者Alexa Fluor 488標(biāo)記的抗體)結(jié)合使用。
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
C0704 | SunRed 醋酸 細(xì)胞活性檢測(cè) | 25 mg | 1236RMB |
溶液制備
1.儲(chǔ)備溶液
所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 SunRed 醋酸鹽原液(2至10 mM)
準(zhǔn)備2至10 mM的SunRed 醋酸鹽在DMSO中的儲(chǔ)備溶液。 應(yīng)立即使用原液。
2.工作溶液
SunRed 醋酸鹽工作溶液:
在實(shí)驗(yàn)前,在含有20 mM Hepes緩沖液(HHBS)或您選擇的緩沖液的1X Hank鹽溶液中,以5至10μM制備SunRed 醋酸鹽工作溶液。
樣品分析
1.從細(xì)胞中取出培養(yǎng)基。
2.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的SunRed 乙酸鹽工作溶液。
3.將SunRed 醋酸鹽工作溶液板在室溫或37°C下孵育1小時(shí),避光。 適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于所用的單個(gè)細(xì)胞類(lèi)型和細(xì)胞濃度。 優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。 對(duì)于非粘附細(xì)胞,建議在孵育后以800rpm離心細(xì)胞板2分鐘。
4.監(jiān)測(cè)Ex / Em = 620 / 660nm處的熒光強(qiáng)度(截止640nm)。